Técnica ELISA: Guía completa y fácil
Este artículo fue publicado por el autor Editores el 09/02/2025 y actualizado el 09/02/2025. Esta en la categoria Artículos.
La técnica ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es una prueba de laboratorio que sirve para detectar y cuantificar sustancias específicas, como antígenos o anticuerpos, en una muestra biológica. Esta técnica se utiliza en una variedad de campos, como la medicina, la investigación biológica y la industria farmacéutica.
La técnica ELISA funciona mediante la unión de un anticuerpo específico al antígeno o la sustancia que se está buscando, seguido de la adición de un segundo anticuerpo marcado con una enzima. La enzima produce una reacción que se puede medir y cuantificar, lo que permite determinar la cantidad de antígeno o anticuerpo presente en la muestra.
En esta guía, te presentamos los pasos básicos para realizar una prueba ELISA de manera sencilla y fácil de seguir. ¡Empecemos!
Materiales necesarios
Antes de comenzar, asegúrate de tener todos los materiales necesarios a mano. Estos incluyen:
- Placas de microtitulación
- Anticuerpos específicos
- Antígenos o sustancias a cuantificar
- Enzima conjugada
- Sustrato de la enzima
- Solución de lavado
- Solución bloqueadora
- Dispositivo de lectura
Procedimiento
- Preparación de la placa: La primera etapa consiste en preparar la placa de microtitulación. Esto se hace agregando una solución bloqueadora a cada pozo para prevenir la unión no específica de las moléculas. Deja reposar la placa durante 30 minutos a temperatura ambiente.
- Adición del antígeno: Lava la placa con la solución de lavado y agrega el antígeno a cada pozo. Deja reposar la placa durante 1-2 horas a temperatura ambiente.
- Adición del primer anticuerpo: Lava la placa nuevamente y agrega el primer anticuerpo específico, el cual se unirá al antígeno. Deja reposar la placa durante 1-2 horas a temperatura ambiente.
- Adición de la enzima conjugada: Lava la placa una vez más y agrega la enzima conjugada. Esta enzima se unirá al primer anticuerpo. Deja reposar la placa durante 30 minutos a temperatura ambiente.
- Adición del sustrato: Lava la placa y agrega el sustrato de la enzima. La enzima reaccionará con el sustrato y producirá un producto visible. Deja reposar la placa durante 15-30 minutos a temperatura ambiente.
- Lectura de la placa: Utiliza un dispositivo de lectura para medir la cantidad de producto visible en cada pozo. Esto te permitirá cuantificar la cantidad de antígeno o anticuerpo presente en la muestra.
Consejos y recomendaciones
- Asegúrate de usar guantes y de trabajar en un ambiente limpio para prevenir la contaminación.
- Sigue cuidadosamente las instrucciones del fabricante para cada reactivos y materiales utilizados.
- Utiliza una placa nueva para cada prueba y desecha los residuos de manera adecuada.
- Ten cuidado al manipular la enzima y el sustrato, ya que estos reactivos pueden ser tóxicos.
Preguntas frecuentes
¿Qué es la técnica ELISA?
La técnica ELISA es una prueba de laboratorio que sirve para detectar y cuantificar sustancias específicas, como antígenos o anticuerpos, en una muestra biológica.
¿Para qué se utiliza la técnica ELISA?
La técnica ELISA se utiliza en una variedad de campos, como la medicina, la investigación biológica y la industria farmacéutica.
¿Cómo funciona la técnica ELISA?
La técnica ELISA funciona mediante la unión de un anticuerpo específico al antígeno o la sustancia que se está buscando, seguido de la adición de un segundo anticuerpo marcado con una enzima. La enzima produce una reacción que se puede medir y cuantificar, lo que permite determinar la cantidad de antígeno o anticuerpo presente en la muestra.
Referencias
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